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产品概述

苏木素(Hematoxylin , H)是一种碱性染料,可将细胞核和细胞内核糖体染成蓝紫色,被碱性染料染色的结构具有嗜碱性。伊红(Eosin , E)是一种酸性染料,能将细胞浆染成红色或淡红色,被酸性染料染色的结构具有嗜酸性。苏木素伊红染色后细胞核呈现蓝色,细胞浆呈现粉红色或红色。

本试剂盒可以和免疫荧光染色配合使用,染色液可以重复使用,直至认为效果不佳时再换用新的染色液。本试剂盒至少可以染色200个样品。


操作流程

1. 样品处理

①对于石蜡切片:

二甲苯中脱蜡5-10min,换用新鲜的二甲苯再脱蜡5-10min,之后用乙醇梯度复水,即无水乙醇5min,90%乙醇2min,70%乙醇2min,最后蒸馏水浸泡2min。

②对于冰冻切片来说,直接蒸馏水2min。

③对于培养细胞:

用4%多聚甲醛固定10min以上,用蒸馏水洗涤2min,之后再换用新鲜的蒸馏水洗涤2min。

2.苏木素伊红(HE)染色

将处理好的样本进行苏木素染色液染色1-2min(可以根据染色结果及要求进行时间调整)→ 用自来水浸洗 10min → 蒸馏水洗涤数秒 → 浸入95%乙醇5s → 伊红染色液染色30s-1min(可以根据染色结果及要求进行时间调整)→ 如果需要直接观察,可以用70%乙醇洗涤2次。如需脱水、透明后封片按后续步骤进行,70%乙醇洗涤后仍可按照后续步骤进行脱水、透明和封片处理。

3. 脱水、透明、封片或进行其它染色

95%乙醇脱水2min → 新鲜95%乙醇脱水2min → 二甲苯透明5min → 新鲜二甲苯透明5min → 中性树胶封片。 

如果进行免疫荧光染色,在伊红染色液染色后用 70%乙醇洗涤2次,每次2min, 之后用PBS或生理盐水或TBS或 TBST等用于免疫染色或荧光染料染色的溶液浸泡5min,就可以进行免疫荧光染色或其它荧光染料的染色。

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