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产品概述

本试剂盒适用于免疫组化方法的石蜡包埋和冰冻切片


操作流程

1. 切片,烤片60℃ 1h。

2. 脱蜡及复水。

3. PBS浸洗3次,每次3min。

4. 抗原修复。(一般来说,常见的修复方式有:EDTA、柠檬酸、蛋白酶K,可根据一抗进行选择。)

5. PBS浸洗3次,每次3min。

6.30%H2O2(1000μlPBS+200μl30%H2O2)室温避光孵育15min。

7. PBS浸洗3次,每次3min。

8. 加适量山羊血清封闭15min,覆盖住样本即可。

9. 滴加一抗,4℃过夜孵育。

10.PBS浸洗3次,每次3min。

11. 滴加抗小鼠生物素化二抗(使用浓度为1:100-1:300),37℃孵育1h。

12. PBS浸洗3次,每次3min。

13. 滴加HRP标记的链霉亲和素三抗(使用浓度为1:100-1:300),室温孵育30min。

14. PBS浸洗3次,每次3min。

15. DAB显色5min。(900μlPBS+50μl20xDAB显色液A+50μl20xDAB显色液B)

16. 蒸馏水浸洗。

17. 苏木素复染2-3min。

18. 用1%的盐酸酒精分化数秒,自来水返蓝。

19. 脱水透明。

20. 中性树胶封片。

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