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产品概述

产品名称:真菌基因组DNA提取试剂盒

 

产品概述:真菌基因组DNA提取试剂盒(Fungi Genomic DNA Extraction Kit)可以从真菌组织细胞中提取基因组DNA, 提取得到的基因组DNA可用于PCR反应、Southern杂交以及RAPDAFLPRFLP等多种分子生物学实验。

 

包装信息:

试剂名称

1T

保存条件

DNA提取缓冲液

400ul     8ml

室温

2.5mg/ml溶菌酶

100ul     2ml

-20

20mg/ml蛋白酶K

5ul       0.1ml

-20

Buffer A

50ul      1ml

室温

BufferB

200ul     4ml

室温

Buffer C

750ul      15ml

室温

Buffer D

750ul       15ml

室温

TE

50ul       1ml

室温

注意事项

1.若基因组DNA需长期保存时 , 建议用TE溶解

2. 如果细胞后过于黏稠,可适当延长溶菌酶及蛋白酶K的反应时间。

操作流程

步骤

1.收集约100-200mg的菌,将其置于玻璃匀浆器内,加入400ulDNA提取缓冲液研磨,之后转至1.5ml离心管内,加入100ul 2.5mg/ml溶菌酶,室温放置1h

2.向离心管内加入50ul Buffer A,5ul 20mg/ml蛋白酶K,55℃孵育1h,期间震荡几次离心管。

3.向离心管内加入200ul Buffer B750ul Buffer C,震荡混匀10min10.000rpm离心10min

4.将最上层的上清液转移至新的1.5ml离心管中,加入750ul Buffer D,震荡混匀,12.000rpm离心10min,弃上清加入预冷的500ul 75%乙醇,洗涤一次沉淀,10.000rpm离心10min

5.室温放置几分钟待乙醇挥发,加入50ul的灭菌蒸馏水或者TE溶解DNA

6.将提取到的基因组DNA可通过电泳或吸光度测定以定量。之后将其保存于-20℃。



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