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产品概述

碱性磷酸酶ALP几乎存在于身体各种组织中,是膜结合酶。肠上皮、肾小管、成骨细胞、肝脏、胎盘及白细胞中尤其丰富。血清中ALP主要来源于肝和骨。ALP与肠内脂质转移及骨质钙化有关。血清ALP测定对肝胆系统及骨骼系统疾病的研究有参考意义。 碱性磷酸酶分解磷酸苯二钠,产生游离酚和磷酸,酚在碱性溶液中与4-氨基安替吡啉作用经铁氰化钾氧化生成红色醌衍生物,根据红色深浅可以测定酶活力的高低。 本试剂盒可测动物血清(浆)、组织、各种体液、灌流液、各种培养细胞以及细胞培养上清液等。


操作流程

1. 样本前处理:
(1)血清(浆):可直接取样用于测定(个别含量过高的样本需要稀释后测定,如鸡血清(浆)中ALP活力较高, 一般需要用生理盐水5倍或10倍稀释后待测)。
(2)组织:准确称取待测组织的重量,按重量(g):体积(ml)=1:9的比例,加入9倍体积的生理盐水进行匀浆,2500rpm,离心10min,取上清液进行测定。
2. 血清(浆)中ALP的测定,如下操作表:

2.血清(浆)中ALP活力计算公式:
单位定义:100ml 血清在37℃与基质作用15min产生1mg酚为1个金氏单位。
血清中ALP活力(金氏单位/100ml)=(测定OD值/标准OD )x标准管含酚的量(0.005mg)x(100ml/0.05ml)
3. 组织匀浆中ALP的测定,如下操作表:

组织中ALP活力计算公式:
组织中ALP活力计算公式单位定义:每克组织蛋白在37℃与基质作用15min产生1mg酚为1个金氏单位。
组织中ALP活力(金氏单位/gprot)=(测定OD值/标准OD值)× 标准管含酚的量(0.003mg)÷(待测样本蛋白浓度(gprot/ml)×(取样量/0.03ml))

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