好评率
100%

产品概述

本试剂盒是从琼脂糖凝胶中回收纯化DNA片段的试剂盒,其采用了独特的融胶液,其溶胶能力很强,无需加热,在室温(15-25℃)条件下即可快速溶解凝胶。本试剂盒结合DNA制备膜技术 , 具有高效、快速、方便之特点,全套操作只需20min便可完成。使用本试剂盒每次可纯化得到多至20µg以上的DNA片段(50bp-20kb), 回收率高达50%-80% ,20bp-50bp的DNA片段回收率略低。经本试剂盒回收纯化的DNA片段纯度高,完整性好,可直接用于连接反应、PCR扩增、DNA测序等各种分子生物学实验。


操作流程

使用前准备事项
1. 首次使用前,向洗涤液中添加56ml(50T)的100%无水乙醇。
2. 检查融胶液是否透明,因为融胶液在低温状态下可能会出现沉淀,如果使用前出现沉淀,请于37°C加热至沉淀消失并恢复至室温后使用。
操作方法
1. 使用TAE缓冲液或TBE缓冲液制作琼脂糖凝胶,然后对目的DNA进行琼脂糖凝胶电泳。
2. 在紫外灯下切出含有目的DNA的琼脂糖凝胶,用纸巾吸尽凝胶表面的液体。胶块超过300mg时,请使用多个收集管进行回收,否则影响回收率。
3. 切碎胶块。胶块切碎后可以加快胶块溶解时间,提高DNA回收率。
4. 称量胶块重量,计算胶块体积。计算胶块体积时,以1mg=1µl进行计算。

5. 向胶块中加入胶块融胶液 , 体系设置详情请参照万类生物官网。

6. 均匀混合后室温15-25°C溶解胶块(胶浓度较大或比较难溶时可以在37°C加热)。此时应间断振荡混合,使胶块充分溶解(约5-10min)。(注: 当分离小于400bp的DNA片段时,应在此溶液中加入终浓度为20%的异丙醇。)
7. 将试剂盒中的吸附柱安置于收集管上,并将步骤6的溶液转移至吸附柱中,12000rpm离心1min,弃滤液。(注:如将滤液再加入吸附柱中离心一次,可以提高DNA的回收率。)
8. 将700µl的洗涤液加入吸附柱中,放置1min后室温12000rpm离心30s,弃滤液。
9. 重复操作步骤8。
10. 将吸附柱安置于收集管上,室温12000rpm离心1min,并在超净台内吹干。
11. 将吸附柱安置于新的1.5ml的离心管上,在吸附柱膜的中央处加入30µl灭菌蒸馏水或洗脱液,室温静置1min。(注:将灭菌蒸馏水或洗脱液加热至60°C使用时有利于提高洗脱效率。)
12. 室温12000rpm离心1min洗脱DNA.

湖北快3投注平台 pc蛋蛋 江苏快3开户 江苏快3平台 pc蛋蛋 pc蛋蛋 河北快3平台 pc蛋蛋 河北快3 pc蛋蛋手机官网
0

服务热线

400-602-0407

App下载
关注公众号