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产品概述

2xPCR Master Mix中含有2xTaq DNA Polymerase , 2xPCR Buffer , 2xdNTP , 只需加入适量引物、模板和水即可进行PCR扩增。大大简化了PCR操作,使操作更加快捷,也减少了PCR操作过程中可能导致的污染,使PCR的重复性更好。利用2xPCR Master Mix可以进行各种常规的PCR扩增,特别适合用于定量和半定量的PCR扩增,以及2kb以 下DNA片段的T载体克隆。 本试剂盒用于50μl的PCR反应体系,足够用于160个反应,用于20μl的PCR反应体系,足够用于400个反应。


操作流程

1. PCR反应体系设置 :
a. 溶解并混匀PCR反应所需的各种溶液,将2xPCR Master Mix 置于冰浴上或冰盒内。

b. PCR反应体系设置详情请参照万类生物官网。

c. 用移液器轻轻吹打或轻微Vortex混匀,室温离心数秒。
d. 将设置好的PCR反应管置于PCR仪上,开始PCR反应。
2. PCR反应体系设置详情请参照万类生物官网。

a. PCR反应的设置需根据模板、引物、PCR产物的长度和GC含量等条件的不同设定不同的PCR反应条件包括温度、时间和循环数等。
b. STEP4(延伸)的时间设置需根据PCR产物的长度进行设置,通常每kb产物的延伸时间为1min。例如PCR产物的长度为1kb,则延伸时间可以设置为1min,PCR产物的长度为2kb,则延伸时间可以设置为2min,以此类推。
3.反应结束后,取出反应液10μl进行琼脂糖凝胶电泳,确认PCR反应产物。如果此PCR反应产物需用于以后实验,应将PCR产物冻存保存。

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