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产品概述

丙二醛(Malomdialdehvde,MDA)是机体内的氧自由基攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸,形成的脂质过氧化物,测试MDA的量可反映机体内脂质过氧化的程度,间接地反映出细胞损伤的程度。

丙二醛是常用的膜质过氧化指标,在酸性和高温度条件下,可以与硫代巴比妥酸(TBA)反应生成红棕色的 三甲川(3,5,5—三甲基恶唑-2,4-二酮),其最大吸收波长在532nm。

本试剂盒可测血清、血浆、乳汁等细胞外液;肿瘤细胞、红细胞、白细胞、各种培养细胞以及各种动植物组织等样本中MDA的含量。


操作流程

1. 样本收集与前处理 :
a. 血清(浆)可直接测定。
b. 红细胞:需要用蒸馏水将红细胞制备成溶血液(100倍溶血液)后测定。
c. 动物组织样本:可用生理盐水按重量/体积比为1/10制备成组织匀浆液,离心取上清测定。

d. 培养细胞、细菌、植物组织:常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。

注:a*表示所取的样品量、标准品量、无水乙醇的量、试剂一的量,四者均相等。例如样品取0.1ml则标准品、无水乙醇、试剂一也取0.1ml,若样品取0.2ml则标准品、无水乙醇及试剂一也取0.2ml。因吸光度与加样量呈正比曲线,因而结果不受影响。
**一般情况下 , 标准管、空白管及对照管每批只需做1-2只,若样本不存在溶血、脂血现象,则对照管可以不测,用空白管来代替对照管。
2. 按上表加入样本和试剂。漩涡混匀 , 试管口用保鲜膜扎紧 , 用针头刺一小孔 ,95℃沸水浴40minwanlei。
3. 取出后流水冷却,然后12000rpm,离心5min。
4.取上清,再次12000rpm,离心2min。
5. 取上清,532nm处,1cm光径,测各管吸光度值 , 并按照下列公式进行计算。
计算公式:
1. 血清(浆)等液体样本中MDA含量计算公式:
血清(浆)中MDA含量(nmol/ml)= (测定OD值 - 对照OD值)/(标准OD值 - 空白OD值)x标准品浓度(10nmol/ml) x样本测试前稀释倍数
2. 组织样本中MDA含量计算公式:
组织中MDA含量(nmol/mgprot)=( 测定OD值 - 对照OD值) /(标准OD值 - 空白OD值)x标准品浓度(10nmol/ml) ÷ 待测样本蛋白浓度(mgprot/ml)

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